? ? ? ?目前有一種觀點，建議我們應去除培養(yǎng)液中的酚紅，認為酚紅只是一個pH指示劑，沒有營養(yǎng)和支持功能，可能會有一些不良影響。對于顏色，大多數(shù)商業(yè)培養(yǎng)基的pH值范圍很窄（比如7.2-7.6），在這個范圍內，你不能通過顏色來判斷pH值。

? ? ? ?持這些觀點的人還認為，許多商業(yè)化的培養(yǎng)液，都不含酚紅, 甚至被宣稱為新一代培養(yǎng)液。

? ? ? ?我正在寫一本書（未出版）給新一代胚胎學家。然而，在一些問題上，我們必須小心。我們目睹了新一代序貫培養(yǎng)液和新一代干式培養(yǎng)箱（出版中的觀點性文獻①）的興衰?；蛘呤恰盁o毒性”的新一代玻璃化試劑，丙二醇取代了實際上毒性更小的DMSO…

? ? ? ?讓我對這一革新嘗試也表示懷疑。

? ? ? ?我們在世界上最高效的牛體外胚胎生產系統(tǒng)中一直使用含酚紅的試劑，也在不同物種的玻璃化冷凍試劑中使用。目前沒有確鑿的證據(jù)表明酚紅對動物或人類胚胎有害。在PubMed分析的3200萬篇引用中，沒有一篇關注它（用“酚紅”做一個簡單的搜索：36個條目，沒有一個是相關的）。一些摘要和評論表達了懷疑，主要是因為一些酚紅樣品可能存在潛在的污染物，但我們離任何結論性的證據(jù)都還很遠。

? ? ? ?我可能比大多數(shù)人培養(yǎng)出了更多的哺乳動物胚胎，總數(shù)接近或超過7位數(shù)，所以請允許我建議考慮以下幾點：

? ? ? ?1. 我不同意酚紅的pH值在7.2-7.6之間沒有差異。也許0.1的差異很難察覺，但到了0.2便可以察覺不同，差異在0.4的話，只有盲人或色盲才看不見。我們有一個參考酚紅溶液（含Hepes緩沖溶液）顯示的刻度在7到7.8之間。這些溶液每年都準備好，放在實驗室的架子上便于評估。

? ? ? ?2. 此外，與普遍的看法相反，pH值0.2的改變（如果起始點在生理范圍之間）對胚胎是無害的。然而，你可以在不打開培養(yǎng)箱內玻璃門或只需瞥一眼在臺式培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)皿，便可立即看到任何劇烈的，有害的pH變化。機器和傳感器可能會發(fā)生故障，在哺乳動物胚胎學中，第二個（或第三個）水平的控制從來都是有用的。

? ? ? ?3. 此外，在某些情況下，酚紅可能非常有幫助。舉個例子：當氣體供應在一夜之間中斷，你來到實驗室，看到二氧化碳輸入為零。大多數(shù)培養(yǎng)箱會發(fā)出警報，但也可能有少數(shù)時候不警報，導致無法獲知何時故障?？赡苁窃缟?點，也可能是前一天晚上10點。而且，放在不同位置、不同層、不同隔間的培養(yǎng)皿可能會對缺乏氣體產生不同的反應。只需看一眼培養(yǎng)皿，你就會知道，粉紅色——不用擔心，我們仍然可以繼續(xù)，藍色，嗯…

? ? ? ?4. 我也告訴你一個秘密。當我們在四孔培養(yǎng)皿中，用400μl油覆蓋400μl培養(yǎng)液，培養(yǎng)50枚牛胚胎時，從第1天到第7天沒有體細胞或培養(yǎng)液的更換，我可以用肉眼告訴你結果。如果培養(yǎng)基略顯黃色，則是由于活胚的高代謝活性所致。經過一些練習，這種顏色可用來預估囊胚/卵母細胞率（±5%）。黃色的顯著變化表示50%的提高，即滿意的結果和健康、快樂的胚胎。

? ? ? ?你可能會說pH計也有幫助，但它很復雜。例如，在第3點描述的崩潰情況下，pH值測量本身可能會令胚胎死亡，即使它們在氣體問題中存活下來。

? ? ? ?所以，這是一個選擇，就像在你早上的咖啡里到底加奶還是加糖。有些人不想要糖，因為糖會讓他們發(fā)胖（如果他們只放一塊糖進去，就不會了）。有些人對乳糖過敏（但5毫升的牛奶不會燒壞他們的胃）。真正的決定因素是他們自己的口味（或迷信），而不是結果，因為結果，即胚胎的發(fā)育，都是一樣的。

? ? ? ?總之，酚紅不會傷害胚胎，但可幫助胚胎學家。這就是為什么我們的培養(yǎng)基——與一些“新一代”產品相反——含有酚紅。

摘要

①Vajta,Parmegiani, Chen, Yakovenko: Back to the future: optimised micro-well cultureof individual human preimplantation stage embryos. J. Assist. Reprod. Genet.